甲基綠是具有金屬光澤的綠色微結晶或亮綠色粉末，屬三苯甲烷類堿性染料，以兩種形式存在。Ⅰ式分子式C26H33Cl2N3。分子量458.49。綠色結晶，帶金黃光澤或淡綠色粉末。能溶于水，微溶于乙醇，不溶于醚。通常為氯化鋅的復鹽。Ⅱ式分子式C27H35BrClN3。分子量516.98。綠色粉末，能溶于水呈綠藍色。在pH0.2時溶液呈黃顏色，pH1.8時呈藍色。
甲基綠可用于測定維生素K3，對于維生素K3的測定主要有液相色譜法、熒光法及某些電化學分析法，迄今用分光光度法測定VK3的報道甚少。由于分光光度法有儀器價廉、操作簡便、準確度高等優點在藥物分析中廣泛應用。因此，進一步研究和發展靈敏度高，簡便快速測定VK3的新分光光度法具有重要意義。
研究發現，在pH為8.7~9.5的溶液中，當維生素K3與堿性三苯甲烷染料甲基綠作用時能使甲基綠產生褪色反應，其褪色波長為630 nm，并在紫外區的213 nm和261 nm處出現兩個較弱的吸收峰，褪色反應的表觀摩爾吸光系數ε630=2.13×105 L mo l-1 cm-1，其褪色程度(ΔA)與VK3濃度在0.11~2.40 mg/L的范圍呈正比，反應具有很高的靈敏度，對于VK3的檢出限(3σ)為32.0μg/L。反應也有良好的選擇性，用于針劑中維生素K3的測定，取得了滿意結果。本法不僅靈敏度高，而且簡便快速。
